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        噬菌體制備及定量的一般實驗方案

        放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2013-09-22  來源:實驗室資訊網(wǎng)
        核心提示: 大部分噬菌體展示方案都涉及這樣一個基本步驟:從被感染的細(xì)菌中制備噬菌體或噬菌粒顆粒的儲液(增殖),并滴定這些儲液以測定
              大部分噬菌體展示方案都涉及這樣一個基本步驟:從被感染的細(xì)菌中制備噬菌體或噬菌粒顆粒的儲液(增殖),并滴定這些儲液以測定有感染力的顆粒的濃度。對于噬菌體載體(以及輔助噬菌體),對于噬菌體載體(以及輔助噬菌體),要通過計數(shù)宿主菌菌苔上的噬菌體斑來測定這些可變顆粒的濃度。為了確保能得到一個能繁殖的噬菌體的純培養(yǎng)物,任何時候增殖噬菌體載體或輔助噬菌體,按照這個步驟來進(jìn)行噬菌斑的分離都是可取的。
        對于噬菌粒載體,噬菌粒的滴定涉及對細(xì)菌的感染,以及對得到的抗生素耐受性的克隆的計數(shù)。
        測定噬菌體或噬菌粒制備產(chǎn)物感染力的一個簡便的替代方案是通過吸光度評估濃度。消光系數(shù)(extinctioncoefficient)取決于噬菌體顆粒的大小,而噬菌體顆粒的大小又取決于基因組的大小。一般而言,對于一個輔助噬菌體如VCSMl3,lOD270=1.1X1013個顆粒/m1。但基于吸光度的計算可能對能繁殖的、有感染力的顆粒的濃度評估過高。
         
        編輯:songjiajie2010

         
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        關(guān)鍵詞: 噬菌體 制備
         

         
         
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