核心差異:成分決定功能
1.生理鹽水 (0.85% NaCl):
優(yōu)點:成分極簡(僅氯化鈉)、成本低、易配制、提供基本滲透壓保護(hù)。
致命缺點:無緩沖能力。稀釋酸性(如果汁)、堿性或含緩沖物質(zhì)(如土壤、食品)樣品時,pH值劇烈波動,極易殺死對pH敏感的微生物(多數(shù)細(xì)菌在pH<5或>9時嚴(yán)重受抑)。
適用場景:僅推薦用于pH接近中性、無抑制劑、滲透壓正常的簡單樣品(如部分臨床尿液、分泌物常規(guī)計數(shù))。不推薦作為食品、環(huán)境等復(fù)雜樣品的通用稀釋液。
2.磷酸鹽緩沖液 (PBS):
優(yōu)點:
緩沖能力:核心優(yōu)勢。磷酸鹽緩沖對(pH 7.2-7.4)能有效抵抗稀釋帶來的pH變化,顯著提高微生物(尤其革蘭氏陰性菌)存活率。
提供等滲環(huán)境(含NaCl)。
配制較簡單,成本適中。
缺點:緩沖能力在中性附近最佳,對極強(qiáng)酸/堿樣品(pH<4.5或>8.5)可能不足;不含營養(yǎng)或保護(hù)劑,無法中和消毒劑等抑制劑。
適用場景:是最常用、推薦的通用稀釋液。 廣泛適用于:
食品(菌落總數(shù)、大腸菌群)
水質(zhì)(總大腸菌群)
環(huán)境樣品(土壤、空氣沉降物初步稀釋)
常規(guī)臨床樣本(非血液)
任何需要穩(wěn)定pH的微生物稀釋操作。
3.含保護(hù)成分的緩沖液 (如緩沖蛋白胨水-BPW, 0.1%蛋白胨水, 含中和劑緩沖液):
優(yōu)點:綜合保護(hù)能力最強(qiáng)。
緩沖基礎(chǔ):維持pH穩(wěn)定。
營養(yǎng)支持 (如蛋白胨):為受損細(xì)胞提供能量修復(fù),延長存活,促進(jìn)復(fù)蘇,減少假陰性。
保護(hù)/中和:添加物可中和消毒劑(如卵磷脂-吐溫80中和季銨鹽)、螯合重金屬、或添加表面活性劑(如吐溫80)幫助分散菌團(tuán)。
缺點:成分復(fù)雜,配制繁瑣,成本高;含營養(yǎng)可能致微生物緩慢增殖(影響計數(shù));特定成分可能干擾后續(xù)檢測(如PCR)。
適用場景:處理挑戰(zhàn)性樣品的首選:
含抑制劑樣品:食品(防腐劑、酸)、化妝品、水(余氯)、環(huán)境(農(nóng)藥、重金屬)。
含受損/應(yīng)激微生物樣品:經(jīng)加熱、冷凍、輻照、消毒處理后的檢測。
需長時間稀釋操作的樣品。
標(biāo)準(zhǔn)方法強(qiáng)制要求:如沙門氏菌前增菌常用BPW (ISO/GB 4789.4),環(huán)境監(jiān)測常用含中和劑的稀釋液。