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2012年8月媒體報道，某檢測中心對國內(nèi)三家葡萄酒上市公司的十款葡萄酒進(jìn)行檢測后發(fā)現(xiàn)農(nóng)藥多菌靈、甲霜靈超標(biāo)，這兩種農(nóng)藥均對人體存在致癌風(fēng)險。消息一經(jīng)報道，又一次引起了人們對農(nóng)藥殘留的關(guān)注，多菌靈、甲霜靈的檢測成為檢測機(jī)構(gòu)關(guān)注熱點(diǎn)。查閱已發(fā)表文章中關(guān)于農(nóng)藥殘留的檢測方法，發(fā)現(xiàn)大量文獻(xiàn)報道使用AB SCIEX公司儀器檢測食品中農(nóng)藥殘留[1]，參考文獻(xiàn)報道方法建立關(guān)于多菌靈和甲霜靈的LC-MS/MS檢測方法。
為了更有效檢測和監(jiān)控多菌靈和甲霜靈殘留，需對上述兩種殺菌劑同時進(jìn)行檢測。AB SCIEX公司一直致力于為用戶提供全方位的解決方案，包含 iDQuant™ 農(nóng)殘篩查標(biāo)樣試劑包（見圖1左圖），試劑包含兩百余種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液，除此之外整體方案還提供成熟的適用于多種基體樣品中農(nóng)藥殘留 iMethod™ 測試方法包[2]（見圖1右圖），供廣大檢測機(jī)構(gòu)選擇。以下列出在葡萄酒中上述兩種農(nóng)藥的檢測的詳細(xì)實(shí)驗(yàn)方法。
圖1 AB SCIEX公司整體解決方案
1.樣品前處理方法
稱取10.0 g樣品于50 mL燒杯中，加入20 mL水溶液，稀釋混勻，待凈化。
依次用3.0mL的正已烷+乙酸乙酯（1+1），3.0mL去離子水活化HLB 小柱，待凈化的樣品6.0mL加至SPE凈化柱，萃取過程需要在負(fù)壓條件下進(jìn)行，最后用6.0mL的去離子水洗滌提取容器，一并過柱，抽真空2 min，將小柱抽干；同時準(zhǔn)備活化氨基－硫酸鎂小柱，在LC- NH2氨基小柱中裝入1/3高度的無水硫酸鎂，用5 mL正已烷+乙酸乙酯（1+1）活化氨基－硫酸鎂小柱，最后保持填料上剩余0.5 mL正已烷+乙酸乙酯（1+1）活化溶液；由上而下將HLB 小柱（上）NH2小柱（下）進(jìn)行串聯(lián)，用15 mL正已烷+乙酸乙酯（1+1）分三次對串聯(lián)小柱進(jìn)行洗脫，并且洗脫開始時需要負(fù)壓抽真空，以便洗脫進(jìn)行，收集全部洗脫液于15 mL玻璃刻度試管，置于40 ℃下氮吹干，用甲醇:水為5:95溶解殘?jiān)ㄈ葜?.0 mL，取上層清液供LC/MS/MS分析。
2.LC-MS/MS儀器條件
(1) 液相色譜參數(shù)：
色譜柱： Phenomenex Synergi Fusion-RP 2.0X50mm，4um
流動相：A：水（含5mM 甲酸銨） B：甲醇（含5mM 甲酸銨）
柱溫：30℃，流速：250μl/min；
流動相：A：水（5mM乙酸銨），B：甲醇（5mM乙酸銨）；
梯度洗脫，洗脫條件見表1：
表1液相色譜條件
|
Time(min)
|
Flow Rate (μL/min)
|
A(%)
|
B(%)
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|
0
|
250
|
95
|
5
|
|
5
|
250
|
50
|
50
|
|
12
|
250
|
10
|
90
|
|
14
|
250
|
10
|
90
|
|
16
|
250
|
95
|
5
|
|
17
|
250
|
95
|
5
|
(2) 質(zhì)譜條件參數(shù)：
離子源： Turbo V™ 離子源；
掃描模式：正離子
采集模式：多反應(yīng)監(jiān)測MRM
表2 多菌靈和甲霜靈的離子對及參數(shù)信息表
|
編號
|
英文名
|
中文名
|
Q1
|
Q3
|
RT (min)
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|
1
|
Carbendazim
|
多菌靈
|
192.2
|
160.1*
132.2 |
7.8
|
|
2
|
Metalaxyl
|
甲霜靈
|
280.2
|
220.2*
192.2 |
10.2
|
注：帶*為定量離子對；
以上質(zhì)譜參數(shù)適用于AB SCIEX公司API TripleQuad 3200/4000/4500/5000/5500/6500以及QTRAP 3200/4000/4500/5500/6500型號儀器；
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
多菌靈和甲霜靈總離子譜圖如下：
結(jié)論
AB SCIEX提供的全方位解決方案，可同時測定葡萄酒中多菌靈和甲霜靈。
參考文獻(xiàn)
[1] Kaushik Banerjee, Dasharath P. Oulkar, Soma Dasgupta. Validation and uncertainty analysis of a multi-residue method for pesticides in grapes using ethyl acetate extraction and liquid chromatography–tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A, 2007,1173: 98–109
[2] AB SCIEX官方網(wǎng)站有關(guān)食品及飲料殘留檢測方法的網(wǎng)頁：http://www.absciex.com.cn/products/methods/imethod-tests-for-food-and-beverage
