考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒(常規(guī)法)
簡介：
本考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒(Commassie Blue Staining Kit)采用了最經(jīng)典的考馬斯亮藍(lán)染色和脫色方法，以考馬斯亮藍(lán)
R250為染料，可用于SDS-PAGE或非變性PAGE等蛋白電泳凝膠的常規(guī)染色和脫色，或Western轉(zhuǎn)膜后PAGE膠上殘余蛋白的檢
測。
使用本試劑盒，采用常規(guī)染色脫色方法累計時間達(dá)到2-3小時后可以觀察到蛋白條帶；采用快速染色脫色方法20分鐘左右
即可觀察到蛋白條帶。觀察到最清晰的蛋白條帶則需染色脫色更長時間。
本試劑盒中的染色液和脫色液經(jīng)過改良，不含有毒的甲醇，但含有刺激性氣味的乙酸。
保存條件：
室溫保存，至少一年有效。
注意事項：
可以使用槍頭盒或適當(dāng)大小的培養(yǎng)皿作為染色和脫色的容器。
本染色液呈酸性，有輕微腐蝕性，使用時請作必要防護(hù)。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明：
1. 常規(guī)染色脫色方法：
a. 電泳結(jié)束后，取凝膠放入適量考馬斯亮藍(lán)染色液中，確保染色液可以充分覆蓋凝膠。
b. 置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動，室溫染色1小時或更長時間。
注：具體的染色時間取決于凝膠的厚度和染色時的溫度。凝膠較厚，溫度較低，則染色時間宜適當(dāng)延長。凝膠較薄，溫
度較高，則染色時間可以適當(dāng)縮短。通常染色至凝膠的顏色和染色液的顏色非常接近，在染色液中幾乎看不清凝膠時，
可以認(rèn)為已染色充分。染色2-4個小時或更長時間不會對最終的染色效果產(chǎn)生負(fù)面影響。
c. 倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用至少2-3次。
d. 加入適量考馬斯亮藍(lán)染色脫色液，確保脫色液可以充分覆蓋凝膠。
e. 置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動，室溫脫色4-24小時。期間更換脫色液2-4次，直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去，并
且蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。通常蛋白條帶在脫色1-2小時后即可出現(xiàn)。
注：脫色期間可以在脫色液中加入一片吸水紙，可以使部分染料吸附在吸水紙上，加快脫色。脫色時間過長也會導(dǎo)致蛋
白條帶的顏色變淺。
f．完成脫色后，可以把凝膠保存在水中，用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會發(fā)生溶漲。如需避免溶漲，可以把膠保
存在含20%甘油的水中。長期保存可以制備干膠。
2. 快速染色脫色方法：
a. 電泳結(jié)束后，取膠放入適量考馬斯亮藍(lán)染色液中，微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰，立即停止加熱。
通常對于膠濃度大于10％的膠比較堅韌，在發(fā)生煮沸時不易破損；對于膠濃度小于10%的膠，宜盡量避免煮沸，以免出現(xiàn)
膠碎裂的情況。
b. 隨后在染色液溫度較高的情況下，在室溫?fù)u床上搖動5-10分鐘。
c. 倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用至少2-3次。
d. 加入適量考馬斯亮藍(lán)染色脫色液，確保染色液可以充分覆蓋凝膠。
e. 微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰，立即停止加熱。
f. 隨后在脫色液溫度較高的情況下，在搖床上搖動5-10分鐘。此時通�？梢杂^察到比較清楚的蛋白條帶。