事實(shí)上,只清潔表面是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的,甚至是危險(xiǎn)的。 真正的污染源和交叉污染風(fēng)險(xiǎn),往往隱藏在移液器的內(nèi)部。今天,我們就來徹底講透移液器清潔與內(nèi)部滅菌的正確方法。
第一部分:為什么“只擦表面”是重大誤區(qū)?
移液器的工作原理是通過活塞的上下運(yùn)動(dòng)來吸液和放液。在這個(gè)過程中,氣溶膠、液體微滴甚至倒吸的液體,都會(huì)不可避免地進(jìn)入移液器內(nèi)部通道和活塞表面。
1.看不見的污染:即使外部擦拭得光亮如新,內(nèi)部通道可能已經(jīng)積累了樣品殘留、微生物或核酸酶。這些污染物會(huì)成為下一次移液的污染源,導(dǎo)致:
2.樣本間交叉污染:嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,尤其是對(duì)PCR、qPCR等超敏感實(shí)驗(yàn)可能是毀滅性的。
3.微生物污染:在細(xì)胞培養(yǎng)、微生物實(shí)驗(yàn)中引入雜菌,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。
4.腐蝕活塞和密封圈:高鹽、酸性或有機(jī)溶劑殘留會(huì)加速內(nèi)部元件的腐蝕和老化,影響移液精度和使用壽命。
因此,定期對(duì)移液器內(nèi)部進(jìn)行徹底的清潔和滅菌,不是“可選項(xiàng)”,而是“必選項(xiàng)”。
第二部分:移液器內(nèi)部滅菌的正確步驟(通用流程)
在進(jìn)行任何操作前,請(qǐng)務(wù)必閱讀您所用移液器的廠家說明書,因?yàn)椴煌放、型?hào)的移液器其耐受性和拆卸方式可能不同。
第一步:準(zhǔn)備工作與外部清潔
1.設(shè)置工作區(qū):在潔凈的臺(tái)面上進(jìn)行操作,準(zhǔn)備好手套。
2.卸下吸頭推出器(如可拆卸):許多移液器的下半部分套筒可以旋開。
3.外部清潔:用無絨布蘸取適量清水、肥皂水或70%乙醇,仔細(xì)擦拭移液器外壁,去除表面的污垢和微生物。避免讓液體滲入內(nèi)部。
第二步:拆卸移液器
這是接觸內(nèi)部、進(jìn)行深度清潔的關(guān)鍵一步。
1.解鎖拆卸:參照說明書,通常通過旋轉(zhuǎn)或按壓特定卡扣,將移液器下半部(吸頭承接器部分)與上半部(機(jī)身)分離。
2.取出內(nèi)部組件:小心地取出活塞、密封圈(O-ring)等核心部件。有些移液器是一體式活塞桿,有些則是分體式。務(wù)必輕柔操作,避免劃傷精密活塞表面。
第三步:清潔與浸泡
1.清洗:用溫和的肥皂水或去離子水沖洗拆卸下來的所有部件(下半部套筒、活塞、密封圈等)。對(duì)于頑固污漬,可用軟毛刷輕輕刷洗。
2.浸泡滅菌(根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適方法):
化學(xué)浸泡滅菌(適用所有移液器部件):
常用消毒劑:75%乙醇、異丙醇、稀漂白液(次氯酸鈉,需注意濃度,通常1:10稀釋,浸泡后需徹底沖洗以免腐蝕)、專業(yè)多酶清洗液。
操作:將拆卸下的所有非金屬部件完全浸沒在消毒液中,浸泡30分鐘以上(具體時(shí)間參考消毒劑說明和移液器說明書)。注意:確保所使用的消毒劑與移液器材料相容,避免腐蝕塑料部件。
高溫高壓滅菌(僅適用于有“autoclavable”標(biāo)識(shí)的移液器):
準(zhǔn)備工作:將移液器拆卸。通常機(jī)身(上半部分)不能高溫滅菌。只有下半部套筒、活塞桿等部件可以滅菌。務(wù)必確認(rèn)所有要滅菌的部件都耐高溫。
包裝:將所有可滅菌部件用牛皮紙、滅菌袋或鋁箔紙包好,并標(biāo)注日期。
滅菌參數(shù):通常采用121℃,1bar(100kPa),滅菌20-30分鐘。請(qǐng)嚴(yán)格遵守移液器說明書推薦的滅菌時(shí)間和溫度。切勿過熱,否則會(huì)損壞部件。
冷卻與干燥:滅菌完成后,在無菌環(huán)境下取出部件,并務(wù)必讓其充分冷卻和干燥后再進(jìn)行組裝。熱部件立即組裝會(huì)產(chǎn)生水汽,影響密封性和精度。
第四步:重新組裝與校準(zhǔn)
1.徹底干燥:將所有清洗和滅菌后的部件放在無絨布上完全晾干。確保沒有任何液體殘留,特別是密封圈區(qū)域。
2.涂抹潤(rùn)滑油:根據(jù)說明書建議,在活塞上涂抹少量專用的移液器硅脂潤(rùn)滑油。這能保證活塞運(yùn)動(dòng)順滑,保持密封性和延長(zhǎng)壽命。切忌使用過多。
3.小心組裝:按照反向順序重新組裝所有部件。確保各部位安裝到位,卡扣鎖緊。
4.性能檢查(校準(zhǔn)):經(jīng)過拆卸和滅菌后,強(qiáng)烈建議對(duì)移液器進(jìn)行精度和準(zhǔn)確度的檢查( gravimetric 稱重法校準(zhǔn))。這是確保其恢復(fù)最佳工作狀態(tài)的最后、也是最重要的一步。
第三部分:不同場(chǎng)景下的維護(hù)頻率建議
日常:每次使用后,用70%乙醇擦拭表面。
常規(guī):每月或每季度進(jìn)行一次內(nèi)部清潔(視使用頻率而定)。
強(qiáng)制性:
在轉(zhuǎn)換不同樣品,特別是涉及DNA、RNA、放射性或腐蝕性樣品時(shí)。
在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)、微生物實(shí)驗(yàn)前。
當(dāng)移液器被液體完全污染或倒吸時(shí)(需立即處理!)。
根據(jù)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系(如GLP/GMP)規(guī)定的周期。
總結(jié)與警示
忌:將整支未拆卸的移液器直接浸泡入消毒液中或進(jìn)行高溫滅菌。
忌:使用腐蝕性強(qiáng)的溶劑(如丙酮、強(qiáng)酸強(qiáng)堿)清洗部件。
忌:在部件未完全干燥時(shí)強(qiáng)行組裝。
忌:忽略潤(rùn)滑和校準(zhǔn)步驟。
移液器是科學(xué)家手的延伸,它的“健康”直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的“生命”。摒棄“只擦表面”的僥幸心理,建立科學(xué)、規(guī)范的移液器清潔與滅菌流程,是對(duì)您實(shí)驗(yàn)成果最基本、也是最關(guān)鍵的保障。
希望這篇指南能幫助您和您的實(shí)驗(yàn)室徹底解決移液器維護(hù)的困惑!
附錄:快速參考表
步驟 |
關(guān)鍵動(dòng)作 |
注意事項(xiàng) |
1.準(zhǔn)備與外部清潔 |
卸下推出器,用酒精棉擦拭外壁 |
防止液體流入內(nèi)部 |
2.拆卸 |
參照說明書,分離下半部,取出活塞和密封圈 |
輕柔操作,避免劃傷活塞 |
3.清潔與滅菌 |
化學(xué)浸泡 :75%酒精等,浸泡30min+
高溫滅菌 :121°C, 20-30min |
確認(rèn)材料相容性,僅滅菌耐高溫部件 |
4.干燥與組裝 |
部件完全晾干,活塞涂少量硅脂,小心組裝 |
確保絕對(duì)干燥,潤(rùn)滑脂寧少勿多 |
5.校準(zhǔn) |
進(jìn)行精度和準(zhǔn)確度檢查 |
確保移液性能恢復(fù) |