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      1. 食品伙伴網(wǎng)服務(wù)號(hào)

        HPLC常見問題

        放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2005-11-18
        核心提示:1 . HPLC 靈敏度不夠的主要原因及解決辦法 樣品量不足:解決辦法為增加樣品量 樣品未從柱子中流出:可根據(jù)樣品的化學(xué)性質(zhì)改變流
        1 . HPLC 靈敏度不夠的主要原因及解決辦法
        樣品量不足:解決辦法為增加樣品量
        樣品未從柱子中流出:可根據(jù)樣品的化學(xué)性質(zhì)改變流動(dòng)相或柱子
        樣品與檢測(cè)器不匹配:根據(jù)樣品化學(xué)性質(zhì)調(diào)整波長或改換檢測(cè)器
        檢測(cè)器衰減太多:調(diào)整衰減即可。
        檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)太大:解決辦法為降低時(shí)間參數(shù)
        檢測(cè)器池窗污染:解決辦法為清洗池窗。
        檢測(cè)池中有氣泡:解決辦法為排氣。
        記錄儀測(cè)壓范圍不當(dāng):調(diào)整電壓范圍即可。
        流動(dòng)相流量不合適:調(diào)整流速即可。
        檢測(cè)器與記錄儀超出校正曲線:解決辦法為檢查記錄儀與檢測(cè)器,重作校正曲線。
        2 . 做 HPLC 分析時(shí),柱壓不穩(wěn)定,原因何在? 如何解決?
        原因可能有: ?

        泵內(nèi)有空氣,解決的辦法是清除泵內(nèi)空氣,對(duì)溶劑進(jìn)行脫氣處理;
        比例閥失效,更換比例閥即可。
        泵密封墊損壞,更換密封墊即可。
        溶劑中的氣泡,解決的辦法是對(duì)溶劑脫氣,必要時(shí)改變脫氣方法;
        系統(tǒng)檢漏,找出漏點(diǎn),密封即可。
        梯度洗脫,這時(shí)壓力波動(dòng)是正常的。
        3 .我購買的 HPLC 柱驗(yàn)收測(cè)試時(shí)柱壓過高,請(qǐng)問為什么?
        柱壓過高是 HPLC 柱用戶最常碰到的問題。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的問題,您可按下面步驟檢查問題的起因。

        拆去保護(hù)柱,看柱壓是否還高,否則是保護(hù)柱的問題,若柱壓仍高,再檢查;
        把色譜柱從儀器上取下,看壓力是否下降,否則是管路堵塞,需清洗,若壓力下降,再檢查。
        將柱子的進(jìn)出口反過來接在儀器上,用 10 倍柱體積的流動(dòng)相沖洗柱子, ( 此時(shí)不要連接檢測(cè)器,以防固體顆粒進(jìn)入流動(dòng)性 ) 。這時(shí),如果柱壓仍不下降,再檢查;
        更換柱子入口篩板,若柱壓下降,說明你的溶劑或樣品含有顆粒雜質(zhì),正是這些雜質(zhì)將篩板堵塞引起壓力上升。若柱壓還高,請(qǐng)與廠商聯(lián)系。一般情況下,在進(jìn)樣器與保護(hù)柱之間接一個(gè)在線過濾器便可避免柱壓過高的問題, SGE 提供的 Rheodyne 7315 型過濾器就是解決這一問題的最佳選擇。
        4 .液相色譜中峰出現(xiàn)拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因是什么?
        篩板堵塞或柱失效,解決辦法是反向沖洗柱子,替換篩板或更換柱子。
        存在干擾峰,解決辦法為使用較長柱子,改換流動(dòng)相或更換選擇性好的柱子。

         

         

        編輯:songjiajie2010

         
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