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      1. 食品伙伴網(wǎng)服務(wù)號(hào)

        3M細(xì)菌總數(shù)測(cè)試片操作以及判讀

        放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-05-15
        3M細(xì)菌總數(shù)測(cè)試片操作以及判讀

         

        一、測(cè)試細(xì)菌總數(shù) 操作方法
         
        1、未開封時(shí),冷藏于≤8℃(≤46℉),并在保存期內(nèi)用完,高溫度時(shí),凝固水可以排除,包裝物最好于室溫啟開。 2、已開封的,將封口以膠帶封緊。
        3、保存再封的袋于≤25℃(≤77℉)和溫度<50%,不要冷藏已開啟的包裝袋,并于一個(gè)月內(nèi)使用完。 4、制備1:10和更大稀釋的食物樣品稀釋液,0稱取或吸取食物樣品,置入適宜的無菌容器內(nèi),如均質(zhì)袋、稀釋瓶、WhirlPak bag或者其他滅菌容器內(nèi).
        5、加入適量的無菌稀釋液,包括Buffered peptone Buffer(IDF phopsphate buffer ,用0.0425g/L的KH2PO4調(diào)PH7.2) 、0.1%的蛋白膠水(ISO方法6887) 、緩沖蛋白膠水(ISO方法6579) 、鹽溶液(0.85-0.90%)、bisulfite-free letheen broth或蒸餾水.
        不可使用含有枸櫞酸鹽、酸性亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽的緩沖液. 因?yàn)樗鼈兡芤种咕L(zhǎng)。
        6、攪拌或均質(zhì)樣品。
        樣品的稀釋液調(diào)PH6.5-7.2

        對(duì)酸性樣品的稀釋液用IN NaOH
        對(duì)堿性樣品用IN HCL調(diào)PH

        7、將測(cè)試片置于平坦表面處,揭開上層膜。 8、使用吸管將1mL樣液垂直滴加在測(cè)試片的中央處。
        9、允許使用上層膜直接落下,切勿向下滾動(dòng)上層膜。 10、使用壓板隆起面底朝下,放置在上層膜中央處。
        11、輕輕的壓下,使樣液均勻覆蓋于圓形的培養(yǎng)面積上,切勿扭轉(zhuǎn)壓板。 12、拿起壓板,靜置至少1分鐘以使培養(yǎng)基凝固。
        13、測(cè)試片的透明面朝上,可堆疊至20片,對(duì)有一定濕度養(yǎng)箱能保持最少份損失是需要的。 14、可目視及用標(biāo)準(zhǔn)菌落計(jì)數(shù)器或其它的照明放大鏡計(jì)數(shù),并可參考判讀卡計(jì)算菌落數(shù)。
        15、可以分離菌落作進(jìn)一步鑒定,即掀起上層膜,由培養(yǎng)膠上挑取單個(gè)菌落。  
        二、測(cè)試細(xì)菌總數(shù) 判讀方法  
        Aerobic bacteria count=152
        測(cè)試片中含有一種紅色指示染劑可使菌落著色,計(jì)算所有紅色菌落(不論其大小和顏色深淺均計(jì)算之).
        Count=0
        在petrifilm AC測(cè)試片上,很容易解釋,圖2測(cè)試片上沒有任何菌落生長(zhǎng).
        Count=16
        圖3示有不多的菌落.
        Count=143
        Petrifilm AC測(cè)試片菌落數(shù)適宜計(jì)數(shù)范圍是25-250,見圖4
        Count=560
        測(cè)試片面積約為20cm2,當(dāng)菌落數(shù)超過250個(gè),如圖5所示,為了估計(jì)菌落數(shù),可選擇其中一個(gè)或數(shù)個(gè)有代表性菌落的小方格(1cm2),計(jì)算平均菌落數(shù),再乘以20可得到整個(gè)測(cè)試片上的菌落數(shù)
        Count=tntc(estimated count=103)
        圖6所示petrifilm AC測(cè)試片上菌落太多而無法計(jì)數(shù)(tntc)
        count=tntc(Estimated count=105)
        有很多高數(shù)量菌落,使整個(gè)生長(zhǎng)區(qū)變粉色,如圖7所示,你僅可在生長(zhǎng)區(qū)邊緣現(xiàn)觀察到單個(gè)菌落,應(yīng)計(jì)錄為菌落太多無法計(jì)數(shù)(TNTC)
        count=tntc(Estimated count=103)
        有時(shí)菌落分布出現(xiàn)不均衡,如圖8所示,這也記錄為TNTC.
        Count=tntc(Estimated count=107)
        在圖9中petrifilm AC測(cè)試片上的菌落,最先粗略一看是可計(jì)數(shù)的,然而,你密切注意到生長(zhǎng)區(qū)邊緣,能看到高密度的菌落,應(yīng)記錄為TNTC
        Estimated count=160
        很少數(shù)菌種會(huì)液化petrifilm AC測(cè)試片上的培養(yǎng)基,如圖10所示.若有這種現(xiàn)象發(fā)生,可選擇沒有液化區(qū)的幾個(gè)有代表性菌落的小方格(1cm2),計(jì)算平均菌落數(shù).不要計(jì)數(shù)液化區(qū)內(nèi)的紅點(diǎn).
        Count=83
        因?yàn)樵趐etrifilm AC測(cè)試片上菌落是紅色的,你會(huì)和不透明的不規(guī)則形狀的事物顆粒區(qū)分開,見圓圈1和2.
         
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