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        當前位置: 首頁 » 食品專題 » 生物實驗技術 » 免疫性技術 » 正文

        放射免疫測定胰島素

        放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-06-28

        材料及試劑

        1.胰島素標準品(不同濃度的)

        2125 I-胰島素

        3.抗血清

        4.第二抗體

        5.分析試劑 0.05 Mol/L pH7.4 PBS液+1%正常兔血清。

        6 -計數(shù)儀

        7.試管、加樣器、離心機等

        操作方法:

        1.按表進行。

        胰島素RIA測定方法(單位:μu/ml)

        標準管

        待測管

        0

        10

        20

        40

        80

        160

        1

        2

        試管號

        1,2

        34

        5,6

        7,8

        9,10

        11,12

        13,14

        15,16

        標準品(不同濃度)

        100

        100

        100

        100

        100

        100

        待測血清

        100

        100

        抗血清(二抗)

        100

        100

        100

        100

        100

        100

        100

        100

        分析試劑

        100

        100

        100

        100

        100

        100

        100

        100

        混勻,37溫育2h

        125 I-胰島素

        100

        100

        100

        100

        100

        100

        100

        100

        混勻,37溫育1h

        第二抗體

        100

        100

        100

        100

        100

        100

        100

        100

        混勻,37反應30min

        2.測定和計算 反應完畢后,將各管于室溫3 000 r/ min離心30min,仔細吸取上清液,收集于放射性廢液貯存容器內(nèi)。用 -計數(shù)儀分別測量各管沉淀物(B)的放射性強度(cpm),以兩管的cpm均值表示。再以第1,2管的cpm值為Bo,分別計算結(jié)合率(B%,即B/Bo×100%),用B%為縱坐標,不同濃度胰島素標準品為橫坐標,繪制標準曲線。然后根據(jù)待檢管的B%,從標準曲線中即可查得胰島素的相應含量。

         

         

         

         
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