国产2020最新精品视频,国产呦系列呦交,91天天在线综合播放,h片欧美日最新在线网站

<s id="mwkus"></s>

<output id="mwkus"><div id="mwkus"><ol id="mwkus"></ol></div></output>

<sup id="mwkus"><center id="mwkus"><label id="mwkus"></label></center></sup>

        <output id="mwkus"></output>
      1. VIP標(biāo)識(shí) 上網(wǎng)做生意,首選VIP會(huì)員| 設(shè)為首頁(yè)| 加入桌面| | 手機(jī)版| RSS訂閱
        食品伙伴網(wǎng)服務(wù)號(hào)
         

        RAPD操作要點(diǎn)

        放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-06
          一、 材料
          不同來源的DNA(50ng/ul)。
          二、設(shè)備
          PCR儀,PCR管或硅化的0.5ml eppendorf管,電泳裝置。
          三、試劑
          1、隨機(jī)引物(10mer) (5umol/L):購(gòu)買成品。
          2、Taq酶:購(gòu)買成品。
          3、10xPCR 緩沖液:配方見第八章。
          4、MgCl2 :25mmol/L。
          5、dNTP:每種2.5mmol/L。
          四、操作步驟:
          1. 在25ul反應(yīng)體系中,加入
            模板DNA 1ul (50ng)
            隨機(jī)引物 1ul (約5pmol)
            10xPCR Buffer 2.5ul
            MgCl2 2ul
            dNTP 2ul
            Taq酶 1單位(U)
            加ddH2O 至 25ul
          混勻稍離心, 加一滴礦物油。
          2. 在加熱至90℃以上的PCR儀中預(yù)變性94℃ 2分鐘, 然后循環(huán): 94℃ 1分鐘, 36℃ 1分鐘, 72℃ 1分鐘,共40輪循環(huán)。
          3. 循環(huán)結(jié)束后, 72℃ 10分鐘,4℃保存。
          4. 取PCR產(chǎn)物15ul加3ul上樣緩沖液(6x)于2% 瓊脂糖膠上電泳, 穩(wěn)壓50-100V(電壓低帶型整齊, 分辨率高)。
          5. 電泳結(jié)束,觀察、拍照。
          [注意] 1、電泳時(shí)一般RAPD帶有5-15條, 大小0.1-2.0kb。
              2、 特異性的DNA帶可以克隆作為一個(gè)新的分子標(biāo)記應(yīng)用。
         

         

         
        推薦圖文
        推薦食品專題
        點(diǎn)擊排行
         
         
        Processed in 0.191 second(s), 19 queries, Memory 0.88 M