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        常用的電泳緩沖液

        放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2005-11-18   瀏覽次數(shù):928

        緩沖液

        使用液

        濃貯存液(每升)

        tris-乙酸(tae)

        1×:0.04mol/l tris-乙酸

        50×:242g tris堿

         

        0.001mol/l edta

        57.1ml冰乙酸

           

        100ml 0.5mol/l edta(ph8.0)

        tris-磷酸(tpe)

        1×:0.09mol/l tris-磷酸

        10×:10g tris堿

         

        0.002mol/l edta

        15.5ml85%磷酸(1.679g/ml)

           

        40ml 0.5mol/l edta(ph8.0)

        tris-硼酸(tbe)a

        0.5×0.045mol/l tris-硼酸

        5×:54g tris堿

         

        0.001mol/l edta

        27.5硼酸

           

        20ml 0.5mol/l edta(ph8.0)

        堿性緩沖液b

        1×:50mmol/l naoh

        1×:5ml 10mol/l naoh

         

        1mmol/l edta

        2ml 0.5mmol/l edta(ph8.0)

        tris-甘氨酸c

        1×:25mmol/l tris

        5×:15.1g tris

         

        250mmol/l 甘氨酸

        94g 苷氨酸(電泳級)(ph8.3)

         

        0.1% sds

        50ml 10% sds(電泳級)

        說明:

        ①tbe溶液長時(shí)間存放后會形成沉淀物,為避免這一問題,可在室溫下用玻璃瓶保存5×溶液,出現(xiàn)沉淀后則予以廢棄。

        以片都以1×tbe作為使用液(即1:5稀釋濃貯液)進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳。但0.5×的使用液已具備足夠的緩沖容量。目前幾乎所有的瓊脂糖膠電泳都以1:10稀釋的貯存液作為使用液。

        進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠垂直槽的緩沖液槽較小, 故通過緩沖液的電流量通常較大,需要使用1×tbe以提供足夠的緩沖容量。

        ②堿性電泳緩沖液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配。

        ③tris-甘氨酸緩沖液用sds聚丙烯酰胺凝膠電泳。

        2×sds凝膠加樣緩沖液:

        100mmol/l tris·hcl(6.8)

        200mmol/l二硫蘇糖醇(dtt)

        4%sds(電泳級)

        0.2%溴酚藍(lán)

        20%甘油

        不含dtt的2×sds凝膠加樣緩沖液可保存于室溫,應(yīng)在臨用前取1mol/l貯存液現(xiàn)加于上述緩沖液中。

         
         
          
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