高壓蒸汽滅菌是將待滅菌的物品放在一個(gè)密閉的加壓滅菌鍋內(nèi)，通過加熱，使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽。待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡，然后關(guān)閉排氣閥，繼續(xù)加熱，此時(shí)由于蒸氣不能溢出，而增加了滅菌鍋內(nèi)的壓力，從而使沸點(diǎn)增高，得到高于100℃的溫度。導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的。在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時(shí)，滅菌鍋內(nèi)冷空氣的排除是否完全極為重要，因?yàn)榭諝獾呐蛎泬捍笥谒�蒸汽的膨脹壓，所以，�?dāng)水蒸汽中含有空氣時(shí)，在同一壓力下，含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。所以飽和蒸汽的滅菌更徹底！

一、高壓滅菌鍋使用前要水加到水位線；

二、將需滅菌的培養(yǎng)基、蒸餾水或其它器皿放入滅菌鍋內(nèi)，關(guān)閉鍋蓋，檢查排氣閥、安全閥狀態(tài)（上下排氣閥打開安全閥關(guān)合然后加熱，方便空氣排出，上、下排氣閥都同時(shí)處于開啟狀態(tài)待有水蒸汽從上、下閥溢出，此狀態(tài)保持7、8分鐘后，即排出空氣后上排氣閥關(guān)合，下排氣閥調(diào)小，安全閥保持關(guān)合狀態(tài)）；

三、打開電源，檢查參數(shù)設(shè)置是否正確，然后按下“work”鍵，滅菌鍋開始工作；自動(dòng)派冷氣，到105℃時(shí)，底部排氣閥門自動(dòng)關(guān)閉，然后壓力開始上升；

四、壓力升至0.15MPa（121℃）時(shí)，滅菌鍋再次自動(dòng)放氣，然后開始記時(shí)，一般培養(yǎng)基滅菌20min，蒸餾水滅菌30min；

五、達(dá)到規(guī)定的滅菌時(shí)間后，關(guān)閉電源，打開放氣閥緩慢放氣；當(dāng)壓力指針降至0.00MPa時(shí)，放氣閥無蒸汽排除時(shí)，方可開啟鍋蓋。

六、注意事項(xiàng)

1、汽未放盡前，不得開啟高壓鍋；

2、如果滅菌后的培養(yǎng)基在鍋內(nèi)不及時(shí)拿出，需在蒸汽放盡后將鍋蓋打開，切忌將培養(yǎng)基封閉在鍋內(nèi)過夜。

3、壓力表指針在0.05MPa以上時(shí)，不能過快放汽，以防止壓力急速下降，液體滾沸，從培養(yǎng)容器中溢出。

4、操作過程，請(qǐng)注意安全，小心燙傷。

在一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓下水的沸點(diǎn)是100攝氏度，壓力越高,與之對(duì)應(yīng)壓力下的沸點(diǎn)越高，這里是高壓蒸汽鍋,說明壓力肯定大于一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓(通常情況下的地表面的大氣壓強(qiáng)就認(rèn)為是一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓)，也就是說高壓蒸汽鍋肯定要超過100攝氏度才能沸騰，才能產(chǎn)生蒸汽。至少要等到水煮沸，排出一分鐘左右的蒸汽后再把安全閥關(guān)閉，這樣可以使高壓蒸汽鍋里的壓力迅速上升，原來沸騰的水因?yàn)閴毫Φ目焖偕仙�而停止沸騰，壓力大，沸點(diǎn)高，水蒸汽就變成液體水，而放出大量的汽化潛熱，就是高溫高壓的目的，從而達(dá)到殺菌的目的。在同一溫度下，濕熱的殺菌效力比干熱大，其原因有三：

一是濕熱中細(xì)菌菌體吸收水分，蛋白質(zhì)較易凝固，因蛋白質(zhì)含水量增加，所需凝固溫度降低；

二是濕熱的穿透力比干熱大；

三是濕熱的蒸汽有潛熱存在，每1克水在100℃時(shí)，由氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)時(shí)可放出2．26kJ（千焦）的熱量。這種潛熱，能迅速提高被滅菌物體的溫度，從而增加滅菌效力。